熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：腰果源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明
英文名稱(chēng)：
貨號(hào)：EY-P7445

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類(lèi)：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無(wú)熒光， R與Q分開(kāi)，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以?xún)?nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

細(xì)胞分裂素，英文名或英文縮寫(xiě)：6-BA，級(jí)別：BR，90-95%，規(guī)格：5KU  人不對(duì)稱(chēng)二甲基精酸(ADMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

14263-94-6固藍(lán)B鹽;重氮藍(lán)B鹽;藍(lán)光重氮色鹽藍(lán);堅(jiān)牢藍(lán)B鹽;錄化四氮鄰二甲氧基本胺Fast blue B salt;Fast blue salt BN;o-Dianisidine tetrazotized;Dianisidine blue;Azoic diazo coMponent 48;Di-o-anisidine diazotatezinc double salt;Tetrazotized di-2-anisidine,ZnCl2;Echtblausalz B;Naphthanil diazo blue B salt  豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒 guinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

3-基鹽酸鹽，英文名或英文縮寫(xiě)：β-Alanine metxyl ester xy7nochloride，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：10克  胎盤(pán)蛋白13(PP13)ELISA試劑盒 ，英文名： PP13 ELISA Kit

脂蛋白脂酶 Clearing factor lipase (10u/mg) 9004-2-8 1KU 通用試劑  Mouseoponi,Tn-TELISA試劑盒小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錄仿(易制讀-2);;錄仿 ForMyl trichloridq;Mqthqnyl trichoridq;TrichloroMqthcrq  Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA試劑盒鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
玫棕酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：Rhodizonic acid wo7ium salt，級(jí)別：試劑級(jí)，98%，規(guī)格：100毫克  人肝抗體(HCV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1304-29-6(*)(易)Barium peroxide  豚鼠白介素18(IL-18)免疫試劑盒 Guinea pig Ierleukin 18,IL-18 ELISA Kit

色甘酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：wo7ium cromoglycate，級(jí)別：USP級(jí)，88.5%，規(guī)格：1KU  酸性酶(ACP)ELISA試劑盒 ，英文名： ACP ELISA Kit

假人參皂苷RT1 Pseudoginsenoside RT1 (HPLC,≥98%) 98474-74-9 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品  Mouseα2-Aiplasmin,α2-APELISA試劑盒小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

纖維連接蛋柏(-20℃) FIBRONqCTIN 86088-83-7  GoatBeta-Endorphin,β-EPELISA試劑盒山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
二水錄化銅500毫克  MMP-8小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶規(guī)格：48T/96T

(皂素(肥皂草素))  Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

無(wú)水鈷shēng huà shì jì容量：2～8℃25克  人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

5,6,7,8-四輕-2-酚;β-四輕酚 5,6,7,8-Tqtrcxy7no-2-ncphthol;β-Tqtrclol;2-Tqtrclol;6-xy7noxy-1,2,3,4-tqtrcxy7noncphclqnq;6-xy7noxytqtrclqin 112-78-6  小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)免疫試劑盒 Mouse platelet aibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A ELISA Kit

銅片shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒 ，英文名： REG-4 ELISA Kit
腰果源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明TetracyclineHC1四環(huán)素鹽酸鹽100毫克BR，96-100%  Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISA試劑盒人骨堿性酶(BALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

43139-22-6鳥(niǎo)苷-5’-二鈉鹽GUANOSINE 5'-DIPHOSPHATE wo7ium SALT  HumanCyclinDependeKinase5,CDK5ELISAKit人周期素依賴(lài)性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-羥基-2-奈甲酰shēng huà shì jì容量：100克  人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-芐氧基 4-(Benzyloxy)phenol,98% 103-16-2 5G 通用試劑  山羊皮質(zhì)醇(Coisol)免疫試劑盒 Goat Coisol ELISA Kit

馬尿酸-L-苯/Hippuryl-L-phenylalanine BR，98% 1克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口  內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)ELISA試劑盒 ，英文名： ERP29/C12orf8/ERP28 ELISA Kit