熒光定量PCR試劑盒技術(shù): 本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
 參數(shù)規(guī)格: 產(chǎn)品名稱:乳房鏈球菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒價(jià)格 英文名稱:Streptococcus uberis 貨號(hào):EY-P7242 產(chǎn)品規(guī)格:50T 分類:熒光定量PCR試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。 產(chǎn)品特點(diǎn) 1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增; 2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘; 3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。 在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。 特異性熒光標(biāo)記: TaqMan法 TaqMan探針的特性: (1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等 (2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q) (3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光 (4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針 相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量: 內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。 相對(duì)定量分析方法 : 2-ΔΔCt 前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi) 1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值: ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值: ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator) 3、計(jì)算表達(dá)水平比率: 2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
 熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟: (1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線; (2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。 步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 胰蛋白示 MouseUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISA試劑盒小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 膽鹽5號(hào)NA Elisa藍(lán)耳病檢測(cè)試劑盒5*96孔5*96孔 酪酸脫羧酶shēng huà shì jì容量:5克 HumanAngiotensinⅡReceptor2,AT2RELISAKit人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T D-天冬酰胺一水物 D-Asparagine monohydrate,99% 5794-24-1 5G 通用試劑 人補(bǔ)體受體1(CR1/CD35)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 三典烷 Iodoform 72-47-8 豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒 Guinea Pig Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA kit 粒shēng huà shì jì容量:RT25克 小鼠ⅡD組1脂酶A2(PLA2G2D)ELISA試劑盒 ,英文名: PLA2G2D ELISA Kit potewwiumChloride 100g/250g/500g/1kg Amresco 0395 人促黃體激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanleoopichormone,LHELISAKit 96T/48T 生根粉100克 大鼠泛素蛋白(Ub)免疫試劑盒 Rat Ubiquitin,Ub ELISA Kit 6-溴吲哚 6-Bromo-1H-indolq 2412/9/9 CLIAKitforUb(MouseUbiquitin)ELISAKit小鼠泛素蛋白規(guī)格:48T/96T β-蛋白組學(xué)級(jí)250MLRT 檸檬酸化學(xué)法冰凍切片抗原修復(fù)處理試劑盒20/50次 紅色瓊脂糖凝膠6FF1克2~8℃ 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 13534-89-92,3-二溴2,3-DibroMopyridine 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3 免疫試劑盒 Mouse ans-acting T-cell-specific anscription Factor GATA-3 ELISA Kit 硬脂酸shēng huà shì jì容量:25克 霍亂弧菌(VC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T 2-酰丁內(nèi)酯 2-ccqtylbutyrolcctonq 217-3-7 humanS100calciumbindingproteinA8/calgranulinA,S100A8ELISA試劑盒人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 正二十七烷,英文名或英文縮寫(xiě):Heptacosane,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:25克 ELISAKitBK小鼠血管舒緩激肽規(guī)格:48T/96T 乳房鏈球菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒價(jià)格wo7iumcaonaTE,ANxy7noUS碳酸鈉,無(wú)水ACS級(jí)白色精細(xì)顆粒粉末RTsigma HumanComplemefragme5a,C5aELISAKit人補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 68133-88-0錄亞釕酸銨AMMONIUM AQUOPENTACHLORORUTHENATE(III) 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 碳酸100克 兔過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARA)免疫試劑盒 Rabbit peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARA ELISA kit 2,6-二-4-硝基 2,6-Dichloro-4-nitrophenol,98% 618-80-4 5G 通用試劑 皮質(zhì)酮(CO)ELISA試劑盒 ,英文名: CO ELISA Kit 酚綠B/酸性綠O/酸性綠I/顏料綠/媒染草綠/1-亞硝基-2-酚鐵色淀/1-亞硝基-2-酚-6-磺酸鈉鐵鹽/曬化綠B/酚綠BN/三5,6-二氫-5-(羥基亞)-6-氧代-2-磺酸(2-)-N5,O6鐵酸(III)三鈉/Naphthol green B BS 25克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISA試劑盒兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T |