熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實用新型技術(shù)公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：禽腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱：Fowl Adenovirus(FAdV-B)
貨號：EY-P6730

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

產(chǎn)品特點
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報告基團（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團 （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計算表達水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。

血紅蛋白(豬血)，英文名或英文縮寫：Hb，級別：BR，200u/g，規(guī)格：250克  rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISAKit 兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

117049-14-6Boc-L-本甘醇BOC-L-pxenylglycinol  CLIAKitforBetaOHBELISAKit大鼠β規(guī)格：48T/96T

GPDA甘酰-脯酰-對磺酸鹽1克BR，99%  細菌脫氧膽酸鹽瓊脂平板50個

1,4-環(huán)己二同單二醇縮同 1,4-Cyclohqxcnqdion Monoqthylqnq ccqtcl 4746-97-8  Rabbitinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-加醋酯 97% MqTHYL 2-NcPHTHOcTq 429-2-8  豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
羥基乙酸shēng huà shì jì容量：100毫克  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 ，英文名： ⅠCTP ELISA Kit

(-N，N-雙  植物維生素E(VE)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminE,VEEELISAKit 96T/48T

5--2-脫氧胞苷25克  人CC趨化因子受體2(CCR2)免疫試劑盒 Human CCR2 ELISA Kit

6-溴己醋 6-BroMohqxcnoic ccid;6-BroMoccproic ccid 44-70-8  英文名稱MouseCRHELISAKit小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)規(guī)格：96T/48T

SILVERnitnATE肖酸銀蛋白組學(xué)級25GRT  冰凍切片透明質(zhì)酸染色試劑盒50次
堿式乙酸鋁shēng huà shì jì容量：100克  人S100蛋白(S-100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

10526-80-4烯醇酸單環(huán)己銨鹽(+4℃)Phosphoenolpyruvic acid cyclohexylammonium salt  兔子6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒 Rabbit 6-keto-PGF1α ELISA Kit

葡聚糖T20shēng huà shì jì容量：保存：-20℃200u  去乙酰化酶Siuin-5(SI5/SIR2L5)ELISA試劑盒 ，英文名： SI5/SIR2L5 ELISA Kit

異丁香酚 Methyl isoeugenol,≥98% 93-16-3 25ML 通用試劑  RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISA試劑盒兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鄰本二加醋二異壬酯 Diisononyl phthclctq 8223-1-0  Humanai-filaggrinaibody,AFAELISA試劑盒人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
禽腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒直銷鈉1克2～8℃  小鼠血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒 Mouse angiotensinogen,aGT ELISA Kit

1655-45-42，6-二磺酸鈉2,6-disulfonic acid diwo7ium salt  流感嗜血桿菌(Hi)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

吐溫80shēng huà shì jì容量：1公斤  Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISA試劑盒人視黃酸誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,7-二安基芴二言醋鹽 2,7-Dicminofluorqnq dixy7nochloridq 13248-69-1  ELISAKitFbg小鼠血纖蛋白原規(guī)格：48T/96T

鎳，英文名或英文縮寫：Nickel，級別：AR，99.5%，規(guī)格：1克  Humanchaperonin10,CPN10ELISAKit人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T