人體腦膜組織提取物【Brain: Normal Human Brain Meninges  Derivatives】

顱骨與腦間有三層膜。由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜；三層膜合稱腦膜。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體腦膜組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

POU5F1-OCT44μgAnthraquinone-carboxylic acid1178蒽醌-羧酸

c-Myc4μgAnthraquinone,5-disulfonic acid di salt8535蒽醌,5-二磺酸二鈉鹽

BDNF4μgAnthraglycoside B233131大黃素-O-葡萄糖苷

KLF44μgAnthraflavic acid84-二羥蒽醌

LMNB14μgAnnonacin11355
Dregeoside Ga1  中文名：  分子式：C49H80O17  度：93.0%  兔粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Dregeoside Aa1  中文名：  分子式：C49H78O17  度：97.5%  兔肝細胞生長因子(rabbit HGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Tigogenin  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3  度：98.0%  兔透明質(zhì)酸(rabbit HA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Adynerigenin β-neritrioside  中文名：  分子式：C42H64O17  度：95.0%  兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  

Tenacissoside G  中文名：通關(guān)藤苷G  分子式：C42H64O14  度：%  兔粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISAKit
去甲維拉帕米鹽酸鹽  Norverapamil, Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatcalcitoningenerelatedpeptideELISAKit大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

霉酚酸內(nèi)酯 (EP 雜質(zhì)H)  Mycophenolic Acid Lactone (EP Impurity H)  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatcAMPELISAKit大鼠環(huán)-0酸腺苷(cAMP)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

O-去甲基霉酚酸  O-Desmethyl Mycophenolic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatcAMPELISAKit大鼠環(huán)-0酸腺苷(cAMP)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

霉酚酸-d3 β-D-葡萄糖苷酸  Mycophenolic Acid-d3 β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatcarbonicanhydraseELISAKit大鼠酶(CA)規(guī)格：96T/48T

霉酚酸酰基 β-D-葡萄糖苷  Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucoside  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatcarbonicanhydraseELISAKit大鼠酶(CA)規(guī)格：96T/48T

霉酚酸β-D-葡萄糖苷酸  Mycophenolic Acid β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatcardiacoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

霉酚酸酰基 β-D-葡萄糖苷酸  Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatcardiacoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

阿莫西林-d4  Amoxicillin-d4  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatCardiolipinIgA(ACAIgA))Elisakit大鼠心0脂抗體CardiolipinIgA(ACAIgA)規(guī)格：96T/48T

阿莫西林三水合物  Amoxicillin trihydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatCardiolipinIgA(ACAIgA))Elisakit大鼠心0脂抗體CardiolipinIgA(ACAIgA)規(guī)格：96T/48T

二氫非諾貝特  Dihydro Fenofibrate  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatCardiolipinIgG(ACAIgG)ELISAKit大鼠心0脂抗體CardiolipinIgG(ACAIgG)規(guī)格：96T/48T
人體腦膜組織提取物價格兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒     5α-Androstane-3β,17β-diol  中文名：5α-雄烷二醇  分子式：C19H32O2  度：98.0%

兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISAKit                 Adipic dihydrazide  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2 

兔誘導(dǎo)型NO合酶elisa試劑盒   兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒、兔誘導(dǎo)型NO合酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  6-Aminoindole  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%

兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒              5α-Androstane-3β,17β-diol  中文名：5α-雄烷二醇  分子式：C19H32O2 

兔抑瘤素M(OSM)ELISAKit     5α-Androstane-3β,17β-diol  571-20-0  中文名：5α-雄烷二醇  分子式：C19H32O2  度：98.0%

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。