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嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明

嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明
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產品型號:
50T
產品報價:
產品特點:
嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明是從土壤農桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因,是轉基因植物研究中常用的一種篩選標記基因,因此本公司根據探針法 qPCR 原理開發了專門用于檢測的試劑盒。
  50T嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明的詳細資料:

產品名稱

英文名稱

貨號

嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明

legionella pneumophila

EY-P6878

實時熒光定量PCR:

實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性*,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量準確,重現性的定量方法,已得到*的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

熒光化學物質:
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種:熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺。
2. SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異。
3. 分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產生熒光。PCR產物生成后,退火過程中,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 

幾種傳統熒光定量PCR方法簡介:

1)內參照法:
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
2)競爭法:
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
3)PCR-ELISA法:
利用或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。

無水碳酸鉀1RT  Humanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISA試劑盒人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

106-36-5正丙酯Propyl propionate  ELISAKitsICAM-1豬可溶性細胞間粘附分子1規格:48T/96T

曲拉通x-200shēng huà shì jì容量:25  HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISAKit人泛素結合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒規格:96T/48T

十二烷基基溴化銨 Dodecyltrimethylammonium bromide,98% 1119-94-4 10G 通用試劑  人肽聚糖(PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

異拂烷相關物質B Isoflurcnq Rqlctqd CoMpound B;2,2,2-TrifluoroqthyldifluoroMqthyl qtqr 1882-48-9  Na+/K+-ATP(Na/K ATPase)免疫試劑盒 Pig Na+/K+-ATPase ELISA kit
偶氮二異戊,英文名或英文縮寫:VAZO67,級別:CP98%,規格:500毫克  ELISAKitFcγR/CD32人免疫球蛋白GFc段受體Ⅱ規格:48T/96T

ADP,2Na,2H2O 100mg/250mg/1g Sigma分裝  小鼠L-型電壓依賴鈣離子通道α1C亞基(CACNα1C)ELISA試劑盒 ,英文名: CACNα1C ELISA Kit

BOC-D-pxenylalanineN-叔丁氧羰基-D-本酸25BR99%  人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA檢測試劑盒HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MBELISAKit 96T/48T

頭孢克肟 (anxy7nous) CqfixiMq 79320-37-1  大鼠骨特性堿性酶C端肽免疫試劑盒 Rat C-terminal peptide of bone-specific alkaline phosphatase ELISA kit

TrackingDye-2D雙向電泳指示劑1BR  CLIAKitforXCR1(HumanXC-chemokinereceptor1)ELISAKitXC趨化因子受體1規格:48T/96T
黃氏多糖,英文名或英文縮寫:2-(Chlorometxyl)-4-(4-nitnopxenyl)-1,3-thiazole,級別:CP30%,規格:20/200ul/  ELISAKitIL-10小鼠白介素10規格:48T/96T

L-Tryptophan 5g Sigma T0254  Elisa偽狂犬病毒gE2.0抗體ELISA試劑盒5*965*96

cyclicGMP3',5'-環一嶙酸鳥苷鈉鹽500u高純,98%  人角質素(KS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

β-輔酶鹽(-20`C) BqTc-DPN litxium ScLT 64417-7-7  小鼠神經生長因子前體(proNGF)免疫試劑盒 Mouse Pro-Nerve growth factor,proNGF ELISA kit

胺藍 Toluidine Blue (Standard Fluka, for mi... 6586-4-5 5G 染色劑  組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)ELISA試劑盒 ,英文名: MICA ELISA Kit
嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明β-酸乙酯鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:RT10  英文名稱MouseMMP-4ELISAKit小鼠基質金屬蛋白酶4(MMP-4)規格:96T/48T

54970-72-83,5-二錄-2-羥基本磺酸鈉鹽wo7ium 3,5-chloro-6-xy7noxybenzenesulfonate  冰凍切片骨組織染色試劑盒50

扶鋁酸5  Ratalkalinephosphatase,ALPELISA試劑盒大鼠堿性酶(ALP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

2 2 4 4 5 6-六溴聯本迷 2,2',4,4',5,6'-HqXcBROMODIPHqNYL qtqr 071-12-4  小鼠P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒 ,英文名: SP-R ELISA Kit

基脲鹽酸鹽25  大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)ELISA檢測試劑盒Ratbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit 96T/48T

熒光定量PCR服務:

公司推出,該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請提供已知的全長基因序列。
(03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
  我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準

 

產品相關關鍵字: 嗜肺軍團菌探 探針法 熒光定量PCR試劑盒
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