小鼠腸微血管細(xì)胞提取物【Mouse Intestinal: Normal Intestinal Microvascular Cell Derivatives】

小鼠腸微血管細(xì)胞提取物是從小鼠腸微血管細(xì)胞提取的，小鼠腸微血管細(xì)胞從正常小鼠腸微血管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

貓皰疹病毒1型實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside1714225

兔瘟RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside1714222

支原體PCR檢測(cè)試劑盒Ornidazole167732奧硝唑

衣原體實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒Ophiopogonin D9456194麥冬皂苷D

哺乳動(dòng)物呼腸孤病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Ondansetron996142昂丹司瓊
Levamisole hydrochloride  中文名：鹽酸左旋咪唑  分子式：C11H13ClN2S    豬蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒  

Lenalidomide  中文名：來(lái)那度胺  分子式：C13H13N3O3    豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒  

Leflunomide  中文名：來(lái)氟米特  分子式：C12H9F3N2O2    豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA試劑盒           

L-Dihydroorotic acid  中文名：L-4,5-二氫乳清酸  分子式：C5H6N2O4    豬凋亡相關(guān)因子elisa試劑盒   豬凋亡相關(guān)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬凋亡相關(guān)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬凋亡相關(guān)因子試劑盒、豬凋亡相關(guān)因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

L-Carnosine  中文名：L-肌肽  分子式：C9H14N4O3    豬地塞米松elisa試劑盒   豬地塞米松試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬地塞米松試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬地塞米松試劑盒、豬地塞米松eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
血紅素(>95%,BR)  Hematin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 動(dòng)物源性食品山羊源試劑盒20

聚乙二醇800  PEG 800  質(zhì)量規(guī)格：BR 動(dòng)物源性食品鼠源試劑盒20

炔雌醚;炔雌醇環(huán)戊醚  Quinestrol  質(zhì)量規(guī)格：USP 動(dòng)物源性食品鴨源試劑盒20

二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)  Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom  質(zhì)量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BC 動(dòng)物源性食品羊源試劑盒20

化丙啶(>95% (HPLC),BC)  Propidium iodide  質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BC 動(dòng)物源性食品豬源試劑盒20

十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade)   dodecylbenzenesulfonate  質(zhì)量規(guī)格：>95%,Tech Grade 動(dòng)物源性飼料牛源試劑盒20

硅酸鈉九水(>98%，BR)   silicate hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 動(dòng)物源性飼料羊源試劑盒20

5--3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)  Bluo-Gal  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 動(dòng)物源性飼料樣品處理試劑盒20

氫二鈉二水  Di hydrogen phosphate dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 動(dòng)物脂肪組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

中性蛋白酶  Neutral Protease from Bacillus polymyxa  質(zhì)量規(guī)格：酶活：20萬(wàn)u/g 動(dòng)物直腸組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
小鼠腸微血管細(xì)胞提取物培養(yǎng)谷酰胺、谷酸（兩種均可測(cè)）   Glamine and glamic acid (two can be measured)                 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  中文名：  分子式：C23H37N3O5 

谷酰胺   英文名稱：   ansglaminase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TG  p-Nitrohydrocinnamic acid  16642-79-8  中文名：  分子式：C9H9NO4 

谷酸測(cè)試盒   Glamate test kit  3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  中文名：  分子式：C23H37N3O5  度：98.0%

谷胱甘肽還原酶elisa試劑盒   谷胱甘肽還原酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   谷胱甘肽還原酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：谷胱甘肽還原酶試劑盒、谷胱甘肽還原酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  6-Aminoquinoxaline  6298-37-9  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3 

谷胱甘肽還原酶（GR）測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/48樣              Venlaine hydrochloride  99300-78-4  中文名：鹽酸文拉法辛  分子式：C17H28ClNO2