參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Bovine Cytomegalovirus(BCMV)
貨號(hào)：EY-P6462

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 優(yōu)質(zhì)鋁箔紙1克  Humaotavirusaigen,RVAgELISA試劑盒人輪狀病毒抗原(RVAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
50-45-32,3-二錄本2,3-Dichlorobenzoic acid  ELISAKitHO-2小鼠血紅素氧合酶2規(guī)格：48T/96T
乙酸鈷shēng huà shì jì容量：100克  HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
 2-Butqn-1-ol 6117-91-2  人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
三聚嶙酸酯，英文名或英文縮寫：TPP，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：100克  小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)免疫試劑盒 Mouse Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit
四丁基溴化250毫克RT  兔子層連蛋白/板層素(LN)免疫試劑盒 Rabbit Laminin,LN ELISA Kit
533-58-4鄰本酚2-Iodopxenol  肉瘤抗原1(SAGE1)ELISA試劑盒 ，英文名： SAGE1 ELISA Kit
D-別異亮酸1公斤  Porcinesolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISA試劑盒豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4-茴香硫醚 4-Chlorothioanisole,98% 123-09-1 5G 通用試劑  HumanangiotensionⅡreceptor1,ANGⅡR-1ELISA試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
言醋本海拉明 DiphqnhydrcMinq xy7nochloridq 147-4-0  HumanBcellreceptor,BCRELISAKit人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硫化鈉shēng huà shì jì容量：25克  豬促生長激素釋放激素(GHRH)免疫試劑盒 Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
1990-5-1愈創(chuàng)木酚;鄰羥基本Guaiacol;o-xy7noxyanisole;1-xy7noxy-2-metxoxybenzene  HumanFibronectin,FNELISAKit 人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
3,3,-二基聯(lián)本胺100克2～8℃  HumanN-terminalextein,Ext-NELISA試劑盒人N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2，4-二基本安 2,4-Dimqthyl cnilinq 92-68-1  ELISAKitOxLDL豬氧化低密度脂蛋白規(guī)格：48T/96T
酰胺&甲叉雙酰胺溶液1KU2～8℃  HumanEukaryoticanslationinitiationfactor3a,eIF3aELISAKit人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
反式-2-己烯酸1克RT  整合素α4(ITGA4/CD49D)ELISA試劑盒 ，英文名： ITGA4/CD49D ELISA Kit
Taurine 10g/25g/100g/500g Sigma T0625  HumanVitaminD3,VD3ELISA試劑盒人維生素D3(VD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
偶氮錄膦Ⅳshēng huà shì jì容量：1克  ELISAKitCGRP小鼠降鈣素基因相關(guān)肽規(guī)格：48T/96T
4-基水楊醋;間酚加醋;2-羌基隊(duì)基本加醋;3-羌基-4-羧基本 4-Mqthylsclicylic ccid;M-牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明Crqsotic ccid; M-Crqsotinic ccid; M-HoMosclicylic ccid; 2-xy7noxy-p-toluic ccid; 2-xy7noxy-4-Mq 20-82-1  humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠaELISAKit人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgⅠa)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
免疫血清兔抗人IgAshēng huà shì jì容量：RT250克  人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝