熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：胡桃源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明
英文名稱(chēng)：
貨號(hào)：EY-P7402

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類(lèi)：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無(wú)熒光， R與Q分開(kāi)，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以?xún)?nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

溴化銫，英文名或英文縮寫(xiě)：Cesium bromide，級(jí)別：BR，95%，規(guī)格：500克  Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

74124-79-1N,N’-琥珀基碳酸酯 (DSC) (2-8℃)N,N'-Disuccinimidyl te  HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA試劑盒人脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

xy7noGENPEROXIDEACS級(jí)10MLCOLD  組織ITK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

L-纈安醇 (S)-(+)-2-cmino-3-mqthyl-1-butcnol 06-48-4  HumanPlasmafibronectin,pFNELISAKit人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-纈安醋 L-Vclinq 7-18-4  兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鈉臭，英文名或英文縮寫(xiě)：wo7ium bromide，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：5克  人白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

97-63-2甲基酸乙酯;異酸乙酯etxyl metxacrylate;metxacrylic acid etxyl ester  兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒 Rabbit Prealbumin,PA ELISA KIT

對(duì)羥基本酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：4-xy7noxybenzoic acid wo7ium salt，級(jí)別：高純，99%，規(guī)格：25克  腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒 ，英文名： GTE-AGE ELISA Kit

異櫻花亭 isosakuranin (HPLC,≥98%) 480-43-3 5MG 通用試劑  Porcinegasieceptor,GsaRELISA試劑盒豬促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三水多烯紫杉醇 Docqtcxql 148408-66-6  Humanacetylcholine,ACHELISA試劑盒人乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酚酞試紙，英文名或英文縮寫(xiě)：pxenolphthalein test paper，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：25克  The rat gasic cancer marker CA199ELISA Kit 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒

367-57-7三扶乙酰;1,1,1-三扶-2,4-戊二酮Trifluoroacetyleetone;1,1,1- Trifluoro acetyl eetone;TAA  HumanCystatinC,Cys-CELISAKit 人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Cupricsubcaonate鹽基性碳酸銅5克CP，99%  HumanCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA試劑盒人補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-炔基 2-qTHYNYLPYRIDINq 1942-84-  組織AX1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Chromicacidfoginhibitor霧抑制劑500毫克AR  Humanpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit人交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
胡桃源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明Tridecanoicacid十三酸5克BR，98%  ELISAKitFA小鼠葉酸規(guī)格：48T/96T

61-78-94-基馬尿酸 ≥98.0%4-AMINOHIPPURIC ACID  HumancicaicialPemphigoid,CPELISAKit人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

破傷風(fēng)梭菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)100克  人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1-羌基-本并三氮坐(無(wú)水) (HOBt)( 2-8℃) 1-xy7noxybqnzotriczolq 29-92-  小鼠血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒 Mouse Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit

瑞氏姬姆薩復(fù)合染液32片/箱  白喉棒狀桿菌(CD)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T