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產品描述：
細胞名稱 小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A圖片
形態特性成纖維細胞

生長特性貼壁生長

特征特性L-M(TK-)cells(ATCCCCL-1.3)用Wnt-3A表達載體轉染并在含G418的培養基中篩選穩轉株。Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白。Wnt基因控制胚胎發過程中的許多模式

成和生長事件。這些細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。它們是目前Wnt-3A條件培養基的來源。由于這種條件培養基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對于涉及Wnt-3A條件培養基的實驗有必要用其來源細胞株(ATCCCRL-2648)作對照。

培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清，10%；0.4mg/mlG-418

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

傳代情況PN5

凍存條件*培養基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STR

同工酶

染色體

冷凍保存細胞之方法：
小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細胞裂解液 (陽性對照)

人視網膜色素上皮細胞cDNAHRPEpiC cDNA

真皮成纖維細胞*培養基 100mL

WB-F344細胞，大鼠肝上皮樣干細胞 HL-60(白血病原髓細胞) 大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3

EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)

ZR-75-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK-
小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A圖片*Anti-TOPOIIAlpha/DNATPIIAlpha/FITC熒光素標記DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-TNF-Alpha/RBITC紅色熒光素標記腫瘤壞死因子抗體規格：0.2ml

*Anti-TP53/FITC熒光素標記抗腫瘤P53抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-t-PA/FITC熒光素標記組織型纖溶酶原激活劑抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-TPH/FITC熒光素標記色氨酸羥化酶抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-TPO/FITC熒光素標記兔抗甲狀腺過氧化物酶抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-TRA16/FITC熒光素標記激素受體相關蛋白16抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-TRA16/FITC熒光素標記激素受體相關蛋白/孤兒素受體相關蛋白抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-TRADD/FITC熒光素標記有死亡區的腫瘤壞死因子受體1相關蛋白抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-TPI/FITC熒光素標記拓普西異構酶Ⅰ抗體IgG規格：0.2ml
注意事項：
?1.一般客戶拿到小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A圖片后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；
（3）非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；
（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；
（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；
（7）視具體情況而定。