細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）小鼠骨髓瘤細胞；P3X63-Ag8說明書準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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產品描述：
細胞名稱 小鼠骨髓瘤細胞；P3X63-Ag8說明書
形態特性淋巴母細胞

生長特性半貼壁生長

特征特性這株細胞源自P3K細胞株（源自漿細胞MOPC-21的組織培養株)。能抗0.1mM8-氮雜鳥嘌呤但在HAT培養基中死亡。據報道它是由于缺失了3-酮類固醇還原酶活性的膽固醇營養缺陷型。檢測表明肢骨發育畸

病毒(鼠痘)陰性。

培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清，10%

傳代方法1:2。3天內可長滿。

傳代情況PN5

凍存條件*培養基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STR

同工酶

染色體

注意事項：
?1.一般客戶拿到小鼠骨髓瘤細胞；P3X63-Ag8說明書后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；
（3）非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；
（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；
（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；
（7）視具體情況而定。
IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照)

人神經元cDNAHN cDNA

615小鼠網織細胞性白血病瘤株;L615

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2 II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 Human

IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠骨髓瘤細胞；P3X63-Ag8說明書*Anti-PRDX3/FITC熒光素標記過氧化還原酶3抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-pre-Xprotein(NT)/FITC熒光素標記抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體（N端）IgG規格：0.2ml

*Anti-pre-Xprotein(CT)/FITC熒光素標記抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體（C端）IgG規格：0.2ml

*Anti-PRMT1/FITC熒光素標記蛋白質精氨酸甲基轉移酶1抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-ProADM(Adrenomedullin)-N20peptide/FITC熒光素標記腎上腺髓質素前提N端20肽抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-pro-caspase3/FITC熒光素標記半胱天冬酶-3酶原抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-Profilin1/FITC熒光素標記前纖維蛋白1抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-Profilin2/FITC熒光素標記前纖維蛋白2抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-PROK1/EG-VEGF/FITC熒光素標記內分泌腺衍生血管內皮生長因子抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-Proteasome20SLMP2/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠低分子質量蛋白2抗體IgG規格：0.2ml
冷凍保存細胞之方法：
小鼠骨髓瘤細胞；P3X63-Ag8說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。