揭示可同時檢測基因狀態(tài)和蛋白表達新技術 ELISA試劑盒美國俄亥俄州立大學的研究人員近日開發(fā)出一種新技術，能同時觀察細胞中的基因數(shù)量和蛋白表達。此技術能夠詳細分析基因狀態(tài)以及相應蛋白表達之間的關聯(lián)，并更透徹地了解癌癥及其他復雜疾病。 這種新技術稱為熒光原位基因蛋白分析（fluorescent in situ gene protein assay）。它將傳統(tǒng)的熒光原位雜交（FISH）與原位鄰位連接分析（in situ proximity ligation assay，簡稱PLA）相結合。 PLA分析采用核酸適體（aptamer）或單/多克隆抗體-核酸復合物作為鄰位連接探針。當一對鄰位探針同時識別同一個目標蛋白分子時，它們將在空間位置上相互臨近，通過連接反應形成一段可擴增的DNA標簽序列，該標簽序列能夠反映待測蛋白的種類及濃度。 文章的作者之一，ELISA試劑盒俄亥俄州立大學的Arnab Chakravarti博士表示：“據(jù)我所知，這是目前*個技術，能讓我們了解同一細胞中的基因活性和相應蛋白表達。了解腫瘤中的基因和蛋白表達變化，有助于我們了解是什么驅(qū)動了腫瘤行為。" 文章的通訊作者，亞拉巴馬大學副教授Markus Bredel及其同事首先分析了固定的人膠質(zhì)母細胞瘤細胞，然后分析了石蠟包埋的人膠質(zhì)母細胞瘤組織。在這兩個分析中，他們都發(fā)現(xiàn)了一種表皮生長因子受體基因的突變形式（EGFRvIII）的過表達，并在膠質(zhì)母細胞瘤中發(fā)現(xiàn)了截短蛋白。 他們認為，這種方法有潛力詳細分析細胞和組織中癌基因狀態(tài)及相應蛋白表達之間的關聯(lián)。他們表明，熒光原位基因蛋白分析能夠在細胞水平分辨癌基因和蛋白，這對于異質(zhì)性疾病（如癌癥）特別重要。 因表觀遺傳學和轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的作用，ELISA試劑盒這種方法對癌癥研究很有用。它將基因和蛋白信息相關聯(lián)，能提高生物標志物篩選的可靠性。它還能輔助治療決策，因為有時只篩選基因或蛋白產(chǎn)生了不確定的結果。 |
