小鼠elisa試劑盒中的酶標二抗和顯色液做，陽性值卻很高OD 1.4，這樣看來我的抗原應該沒問題，好像問題出在酶標二抗上，根據客戶留言在網上問題解答如下： 先要確定兩種酶標二抗使用的是不是同一批包被的板，因為雖然是相同的抗原，可能兩次包被不一樣。 如果是同一批板，出現這種情況只能說明你的酶標二抗失活了，買新的二抗，按說明書上的稀釋倍數稀釋；陰性對照有顏色很可能是沒封閉好。陽性值是由你的抗原抗體間親和力決定的，增加抗原抗體用量，或提高二抗濃度，但靈敏度可能會降低，你可以重新摸下工作濃度； 陰性值降低，你可以采用BSA封閉2小時看看，好像沒聽說有人用FCS封閉的，你可以嘗試采用其他的封閉液，據我了解，用BSA封閉不是很好，可以試試脫脂奶粉；再就是TMB本身時間長了就會略顯色，你可以調整顯色時間。 Elisa試劑盒說明： 1．檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法 2．試劑盒保存：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻繁使用時)。 3．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。 4．小鼠elisa試劑盒中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。 5．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正?，F象，不會對實驗結果造成任何影響。 生物素化CD14IgG 人P27蛋白(P27) 生物素化CD20IgG 人OJ/抗異亮氨酰tRNA合成酶(OJ/IleRS) 生物素化CD4IgG 人N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP) 生物素化C-反應蛋白IgG 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG) 生物素化癌胚抗原IgG 人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白(N-Cad) 生物素化促甲狀腺素IgG 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT) 生物素化瓜氨酸環肽 人N端外顯肽(Ext-N) 生物素化腦鈉肽 人N端前腦鈉素(NT-proBNP)
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