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人GPER酶聯免疫分析試劑盒組成說明書 |
點擊次數:950 發布時間:2017/7/4 |
提 供 商: |
上海一研生物科技有限公司 |
資料大小: |
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94 次 |
資料類型: |
JPG |
瀏覽次數: |
950 次 |
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人GPER酶聯免疫分析試劑盒使用目的: 本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中GPER含量。 實驗原理 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人GPER水平。用純化的人GPER抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入GPER,再與HRP標記的GPER抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的GPER呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人GPER濃度。 標本要求 1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融 2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 操作步驟 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 600pg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 300pg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 150pg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 75pg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 37.5pg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 人GPER酶聯免疫分析試劑盒加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 配液:將30倍(48T的20倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 溫育:操作同3。 洗滌:操作同5。 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 人GPER酶聯免疫分析試劑盒測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。 |
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