開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
概述： 熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。
PCR實驗方法步驟： 開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法： 1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix （2mM） 4 μl 引物1（10pM） 2 μl 引物2（10pM） 2 μl Taq酶 （2U/μl） 1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。 3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒注意事項： 1．基礎(chǔ)程序； 2．?dāng)U增溫度和延伸溫度； 3．反應(yīng)時間； 4．循環(huán)次數(shù)； 5．PCR 反應(yīng)液的配制； 6．PCR技術(shù)的基本原理； 7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)； 8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物； 9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。
熒光定量PCR服務(wù)： 簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。 1、開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒熒光定量PCR服務(wù)要求： （01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。 （02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。 （03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等 2、熒光定量PCR操作程序 （01）引物（探針）設(shè)計與合成。 （02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。 （03）進(jìn)行Real Time PCR實驗，進(jìn)行實驗結(jié)果分析。 （04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。 3、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn)： 我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。 |
