其他elisa試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應用，嚴格遵照規定操作，必能得出準確的結果。
可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固后即可取得。除特殊情況外，在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。
血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其中的可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。
一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。其他elisa試劑盒反復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。 辣根過氧化物酶標記腫瘤壞死因子IgG 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE) 辣椒素受體IgG 人卵泡抑素(FS) 賴氨酸缺陷型蛋白激酶1IgG 人卵巢癌標志物CA125 賴氨酸缺陷型蛋白激酶1IgG 人綠膿桿菌外毒素A(PEA) 酪氨酸蛋白激酶Fyn（同步原癌基因）IgG 人硫氧還蛋白還原酶(TrxR) 酪氨酸蛋白激酶受體A4IgG 人硫氧化還原蛋白(Trx) 酪氨酸蛋白激酶受體B2IgG 人流行性乙型腦炎IgG(JE IgG) 酪氨酸蛋白激酶受體B6IgG 人流行性腮腺炎(EP)
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