到了目前為止，我們能夠常見到的幾種ELISA方法有測定抗體的間接法，測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。 以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。免疫酶技術是將酶標記在抗體/抗原分子上，形成酶標抗體/酶標抗原，稱為酶結合物。該酶結合物的酶在免疫反 應后，作用于底物使之呈色，根據顏色的有無和深淺，定位或定量抗原/抗體。ELISA 法是免疫酶技術的一種，其特點是利用聚苯乙烯微量反應板(或球)吸附抗原/抗體，使之固相化，免疫反應和酶促反應都在其中進行。在每次反應后都要反復洗 滌，這既保證了反應的定量關系，也避免了末反應的游離抗體/抗原的分離步驟。在ELISA 法中。酶促反應只進行一次，而 抗原、抗體的免疫反應可進行一次或數次，即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進行免疫反應。
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每種試劑都有其反應模式，其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高，反應時間長，會造成整板本底高，陽性率高。
·精密度：一般指其批內CV，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。
·安全性：指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。
·經濟性：試劑在同等質量條件下通過大規模或技術進步降低成本而市場價格比較合理。
常因樣品采集、貯存、處理不當造成如樣品溶血，被細菌污染，標本凝集不全等。溶血標本，紅細胞溶解破裂，釋放出血紅素形成，而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。
在血標本采集處理時應小心，在冰箱中保存不易過久。
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ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體--聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。ELISA試劑盒 |
