大鼠β細胞素(BTC)elisa試劑盒操作步驟： 1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 120ng/L 5 號標準品 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 60ng/L 4 號標準品 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 30ng/L 3 號標準品 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 15ng/L 2 號標準品 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 7.5ng/L 1 號標準品 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同） 、標準孔、待測樣品孔。 在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl， 待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍） 。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。elisa試劑盒 3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。 4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。 7. 溫育：操作同 3。 8. 洗滌：操作同 5。 9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 10 分鐘. 10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色） 。 11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值） 。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。elisa試劑盒 |
